實(shí)驗(yàn)室胎牛血清使用問題匯總
更新時(shí)間:2021-06-24 點(diǎn)擊次數(shù):746次
實(shí)驗(yàn)室胎牛血清使用問題匯總
血清在使用過程中,有很多的具體注意事項(xiàng),現(xiàn)闡述如下:
1、血清的保存方法。
建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。假如存放于4℃,請(qǐng)勿超過個(gè)月。若血清瓶次無法用完,建議無菌分裝至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。
2、在培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,是否可以長(zhǎng)期保存?
因?yàn)樾┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解,所以新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用完畢。
3、如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱融解,然后在室溫下全融。解凍血清時(shí),必須在融解過程中規(guī)則地?fù)u晃均勻,使溫度及成分均,減少沉淀的發(fā)生。
推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融。因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。
請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
4、血清解凍后為何會(huì)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之。
去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g,1-2分鐘稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。
大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失。
5、如何避免沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均,減少沉淀的發(fā)生。
2) 血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均。
3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
6) 若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。