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蛋白修飾-蛋白質(zhì)修飾譜分析介紹
更新時間:2022-08-09   點擊次數(shù):434次


實驗原理

首先將蛋白樣本酶解成肽段混合物,然后使用液相色譜對酶解后的肽段混合物進行組分分離以降低樣本復(fù)雜程度,然后通過高質(zhì)量的修飾類抗體和生物材料對修飾肽段進行富集,最后上樣至液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜中進行分析,通過相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫檢索匹配,一次可鑒定成百上千個修飾位點。

蛋白分析的應(yīng)用

1. 磷酸化:信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞周期、生長發(fā)育及癌癥機理等;

2.糖基化:蛋白質(zhì)折疊、更新以及免疫應(yīng)答等;

3.乙酰化:基因表達調(diào)控、細胞凋亡、細胞代謝、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性以及神經(jīng)退行性病變等;

4.泛素化:細胞周期、細胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA修復(fù)以及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等;

5.甲基化:染色質(zhì)結(jié)構(gòu)及轉(zhuǎn)錄調(diào)控等;

6.丙?;?/ 丙二酰化 / 戊二?;?/ 琥珀?;褐饕嬖谟诰€粒體和細菌中,與代謝過程密切相關(guān)。

實驗流程

1.蛋白提??;

2.蛋白酶消化;

3.修飾肽段富集

4.LC-MS/MS分析;

4.生信分析。

實驗完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

1. 周期:6周左右

2. 交付標(biāo)準(zhǔn):質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)、蛋白鑒定列表、修飾位點鑒定表、實驗報告(主要儀器、試劑和實驗方法)

需確認的信息

1. 確認樣品所屬種屬、分析需求。


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