CELL-WISE 293培養(yǎng)基品

貨號：CW001

CELL-WISE 293培養(yǎng)基品牌產(chǎn)品特點:

瞬時轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)基，適用于HEK293細胞高密度懸浮培養(yǎng)

無蛋白、無動物源、化學成分限定

即用型培養(yǎng)基,無需添加額外成分

CELL-WISE的293培養(yǎng)基參數(shù)規(guī)格：

外觀：

澄清透明紅色液體

滲透壓：

275±15 mOSM

pH:

6.9-7.4

無菌檢測:

無菌

內(nèi)毒素：

<5 EU/mL

儲存條件

：2-8℃，避光

效期：

12個月

產(chǎn)品用途：

僅用于科學研究，不適用于人類或動物的診斷和治療

CELL-WISE的293培養(yǎng)基使用方法：

細胞馴化

1）直接馴化

大部分情況下，培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細胞，可以直接適應Balance CD 293 medium，只要按照日常傳代方式（稀釋）更換培養(yǎng)基即可。

2）漸進式馴化

注意：選用低代次、處于對數(shù)生長期的細胞進行馴化

①在原培養(yǎng)基中復蘇細胞并繼續(xù)使用該培養(yǎng)基傳代2到3次至細胞生長穩(wěn)定，當細胞密度達到2x10 6 cells/ml后進行傳代，傳代細胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL，5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為75:25；

②將細胞置于37℃，5% CO2，轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng)；

③當細胞密度3-4天后達到3x10 6 cells/ml且細胞活率>90%，傳代時5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為50:50，細胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如細胞生長慢，可離心上清，留20%條件培養(yǎng)基，加入80%的5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基比例為75:25的混合培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)；

④重復步驟③逐步增加Balance CD 293培養(yǎng)基所占的比例(5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90）直到100%的Balance CD 293培養(yǎng)基；

⑤經(jīng)過在100%的 Balance CD 293 培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng)，傳代后3-4天細胞的密度可以達到2-3×10 6 cells/mL，細胞活率大于90%，這說明細胞已經(jīng)適應了Balance CD 293 培養(yǎng)基。之后進行細胞的傳代培養(yǎng)時，細胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL，般傳代2-3次后再進行轉(zhuǎn)染實驗。

注意: 般細胞馴化過程中，三代細胞的狀態(tài)可能不是很好，但般從第四代狀態(tài)會有改善。