文章使用美國Zeta Life公司,Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑(#AD600150,Zeta Life, USA) 將 ABC A9 的特異性 siRNA 轉(zhuǎn)染到(BMDM)骨髓來源的巨噬細胞,根據(jù)zeta life說明書操作方法如下:
1、BMDM巨噬細胞置于 6 孔板中;
2、密度為 2.5 × 105細胞;
3、細胞轉(zhuǎn)染密度為 70%;
4、10 µL siRNA (100 pmol/mL) 和10ul轉(zhuǎn)染試劑室溫混合恒溫 15 分鐘;
5、然后加入含有 1ml 的正常 DMEM培養(yǎng)基到 6 孔板;
6、24 小時后換成新鮮 DMEM培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng);
7、文章作者:第三軍醫(yī)大學(醫(yī)科大學)生物化學與分子生物學系;
8、文章標題:5-aza-2′-deoxycytidine potentiates anti-tumor immunity in colorectal peritoneal metastasis by modulating ABC A9-mediated cholesterol accumulation in macrophages
二、Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細胞、活體動物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑,此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。
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