淺談內(nèi)毒素對細胞培養(yǎng)的影響
關(guān)鍵詞:低內(nèi)毒素DPBS,低內(nèi)毒素產(chǎn)品;品牌BioProE DPBS低內(nèi)毒素
內(nèi)毒素對細胞培養(yǎng)的影響
在細胞培養(yǎng)的精密世界中,一個微小的污染都可能dian覆整個實驗的進程。今天,我們要聚焦的正是這個不容忽視的隱形威脅——內(nèi)毒素。
BioProE是我公司自產(chǎn)的DPBS,低內(nèi)毒素,對細胞的傷害降到zui低!
內(nèi)毒素:細胞培養(yǎng)的“隱形刺客"
內(nèi)毒素,這個聽起來有些陌生的名詞,實際上在細胞培養(yǎng)中扮演著不容忽視的角色。它是革蘭氏陰性菌細胞壁的一種成分,當細菌死亡或細胞壁破裂后,內(nèi)毒素就會被釋放出來。這些微小的分子,雖然肉眼不可見,但卻能對細胞產(chǎn)生巨大的影響。
在細胞培養(yǎng)過程中,內(nèi)毒素的污染可能導致細胞生長緩慢、細胞毒性增加,甚至影響瞬時轉(zhuǎn)染的效率。想象一下,您精心設計的實驗,因為內(nèi)毒素的污染而功虧一簣,是不是非常令人沮喪?對于追求精準與高效的現(xiàn)代生物研究而言,內(nèi)毒素控制成為了不可回避的挑戰(zhàn)。
圖1 內(nèi)毒素分子結(jié)構(gòu)
內(nèi)毒素對細胞培養(yǎng)的影響
1. 免疫和炎癥反應: 內(nèi)毒素可以激活細胞的免疫反應,導致炎癥因子的釋放,如腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-1β(IL-1β)等。這些炎癥因子可以影響細胞的生理功能,導致細胞內(nèi)信號通路的紊亂,甚至可能引發(fā)細胞凋亡。
2. 細胞生長和代謝的影響: 高水平的內(nèi)毒素暴露可能影響細胞的生長和代謝。細胞在免疫激活狀態(tài)下可能會減緩生長,因為它們需要將資源用于炎癥反應。此外,內(nèi)毒素可能干擾細胞的代謝途徑,影響蛋白質(zhì)合成、DNA合成等。
3. 實驗結(jié)果的“ding時zhadan":內(nèi)毒素的存在使實驗結(jié)果變得不穩(wěn)定,可靠性大打折扣。
4. 影響細胞因子和蛋白質(zhì)的表達:內(nèi)毒素的存在可能導致細胞產(chǎn)生炎癥相關(guān)的細胞因子和蛋白質(zhì)的表達增加。這可能對特定的研究課題產(chǎn)生影響,如細胞信號通路、蛋白質(zhì)相互作用等的研究。
內(nèi)毒素對瞬時轉(zhuǎn)染的影響
內(nèi)毒素的存在會極大程度地影響轉(zhuǎn)染效率。由于內(nèi)毒素的兩親性和負電荷性,性質(zhì)類似于DNA,因此在質(zhì)粒純化中會伴隨質(zhì)粒一同被純化出來。這些內(nèi)毒素在轉(zhuǎn)染過程中可能與轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒形成不穩(wěn)定的復合物,從而降低質(zhì)粒與細胞的結(jié)合效率和轉(zhuǎn)染效率。
具體來說,高純度的質(zhì)粒、低類毒素細胞生長環(huán)境是獲得高轉(zhuǎn)染效率的必要條件,內(nèi)毒素含量越低,轉(zhuǎn)染效率也相應提高。特別是在使用陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑時,內(nèi)毒素的影響更為顯著,所以確保細胞培養(yǎng)液中低類毒素含量是非常重要的。
1. 轉(zhuǎn)染效率降低:干擾轉(zhuǎn)染復合物進入細胞或影響其在細胞內(nèi)的作用,導致成功轉(zhuǎn)染的細胞比例下降。
2. 基因表達異常:使轉(zhuǎn)入基因的表達水平不穩(wěn)定或降低,影響實驗結(jié)果的準確性和可重復性。
3. 細胞應激反應:引發(fā)細胞一系列應激相關(guān)的信號通路變化,進而間接影響轉(zhuǎn)染過程和后續(xù)的基因表達。
如何降低細胞培養(yǎng)中的內(nèi)毒素含量?
1.所有實驗室器皿、培養(yǎng)基原料、以及適當?shù)膶嶒炇壹夹g(shù)的che底清潔,對于大幅降低細胞培養(yǎng)實驗室中的內(nèi)毒素水平至關(guān)重要。
2.使用來自可靠試劑供應商提供的經(jīng)內(nèi)毒素測試的試劑、補劑和培養(yǎng)基
總之,內(nèi)毒素對細胞培養(yǎng)有負面影響,需要合理選擇試劑,并嚴格控制培養(yǎng)條件,以降低內(nèi)毒素對細胞的不良影響。選擇合適的產(chǎn)品,可以讓你的細胞培養(yǎng)實驗更省心,尤其是難養(yǎng)的免疫細胞,干細胞等,更需要使用超低內(nèi)毒素PBS、RPMI1640、DMEM、DMEM/F12等進行培養(yǎng)。
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